read-only имеется ввиду тот, что explorer показывает в properties. Пробовал os.chmod, но не помогло. Я так понял, что chmod изменяет permissions. Спасибо.

import os, stat

os.chmod('your_ro_file', stat.S_IWRITE) # Снять ro
os.chmod('your_rw_file', stat.S_IREAD) # Вернуть ro